El objetivo de esta unidad es proporcionar servicios especializados en Microscopia Confocal analizando muestras biológicas de diferente naturaleza.
La Unidad Conjunta PSB-UNQ cuenta con un Microscopio Confocal Espectral Invertido Modelo TCS SP8 DLS de Leica que opera personal especializado de la PSB.
La unidad forma parte del Sistema Nacional de Microscopía del Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación.
Las principales técnicas que se pueden realizar
- Análisis de colocalización
- Inmunofluorescencias y detección de sondas
- Estudios Tridimensionales (Z-Stack, Reconstrucciones 3-D)
- Series Temporales, escaneos del tipo Tile Scan y Mark and Find
- Escaneos de espectros de emisión
- FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)
- Interacción de proteínas mediante FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer)
- Localizaciones subcelulares mediante proteínas fluorescentes
Aplicaciones
- Análisis tridimensional de muestras biológicas.
- Detección con mayor sensibilidad.
- Imágenes de muestras con mayor resolución y mejor calidad.
- Observación de células vivas y tejidos en una atmósfera controlada.
- Estudios de procesos dinámicos en células vivas.
- Posee Tecnología DIC (Differential Interference Contrast) para obtener imágenes adecuadas de muestras sin teñir que a menudo sólo proporcionan una imagen débil en el campo claro.
- Posee Tecnología DLS (Digital Light Sheet) para capturar imágenes de muestras fotosensibles o de eventos biológicos rápidos debido a la iluminación de la muestra en único plano, lo que permite reducir el efecto fototóxico. https://www.leica-microsystems.com/science-lab/confocal-and-digital-light-sheet-imaging/
- Cuenta con tecnología Lightning que permite resolver estructuras a nanoescala (hasta 120 nm), obtener imágenes en tiempo real y mantener la resolución y la velocidad de la adquisición de datos. https://www.leica-microsystems.com/products/confocal-microscopes/p/lightning/
- Análisis tridimensional de muestras biológicas.
- Detección con mayor sensibilidad.
- Imágenes de muestras con mayor resolución y mejor calidad.
- Observación de células vivas y tejidos en una atmósfera controlada.
- Estudios de procesos dinámicos en células vivas.
- Posee Tecnología DIC (Differential Interference Contrast) para obtener imágenes adecuadas de muestras sin teñir que a menudo sólo proporcionan una imagen débil en el campo claro.
- Posee Tecnología DLS (Digital Light Sheet) para capturar imágenes de muestras fotosensibles o de eventos biológicos rápidos debido a la iluminación de la muestra en único plano, lo que permite reducir el efecto fototóxico. https://www.leica-microsystems.com/science-lab/confocal-and-digital-light-sheet-imaging/
- Cuenta con tecnología Lightning que permite resolver estructuras a nanoescala (hasta 120 nm), obtener imágenes en tiempo real y mantener la resolución y la velocidad de la adquisición de datos. https://www.leica-microsystems.com/products/confocal-microscopes/p/lightning/
Características técnicas del equipo
Microscopio invertido Leica DMI8
– Cabeza de barrido confocal Leica TCS SP8 con sistema de detección espectral de alta sensibilidad.
– Caja de láseres flexible AOTF (Acousto Optical Tunable Filter): las intensidades de las diferentes líneas de láser se pueden controlar entre 0% y 100%.
– 8 líneas de excitación láser controlados por filtro óptico modificable (AOTF) para un preciso control (0-100%):
- Ultra violeta: 405 nm
- Argón: 458, 476, 488, 496, 514 nm (único gaseoso)
- Amarrillo: 561 nm
- Rojo: 633 nm
-Tecnología AOBS (Acousto Optical Beam Splitter): permite seleccionar un rango específico de detección de fluorescencia.
– Lámpara UV para visualización en epifluorescencia con filtros DAPI, CFP, GFP y YFP.
– 2 canales de detección de alta sensibilidad (HyDs) , 2 canales PMT con tecnología Photon Booster y un canal de luz transmitida.
-Escaneo bidireccional: permite aumentar la velocidad de escaneo, puede trabajar a una velocidad de 8000 Hz, la velocidad convencional de escaneo es de 400 Hz. De esta manera se disminuye el photobleaching.
-ZooM: permite aumentar la magnificación en una región hasta 10-15x.
– Objetivos:
- 2.5x/ PL APO
- 5x/PL APO
- 10x/0.40 PL APO CS2
- 20x/0.75 PL APO CS2
- 40x/1.10 PL APO CS2 (inmersión en agua)
- 63x/1.40 PL APO CS2 (inmersión en aceite)
– Objetivos para DLS:
- Illuminación: 2.5x/0.07, 5x/0.15
- Detección: 5x/0.15, 10x/0.3, 25x/0.95 (10x y 25x immersión en agua)
– Platina XY motorizada para escaneos del tipo Tile Scan y Mark and Find.
– Platina Super Z Galvo que permite obtener imágenes con mayor nitidez, velocidad y precisión en el plano Z. Además permite observar en vivo en el eje Z.
– Detección secuencial de la fluorescencia.
– Incubadora para ensayos In vivo, incluyendo equipo para control de la temperatura y CO2
– Cabeza de barrido confocal Leica TCS SP8 con sistema de detección espectral de alta sensibilidad.
– Caja de láseres flexible AOTF (Acousto Optical Tunable Filter): las intensidades de las diferentes líneas de láser se pueden controlar entre 0% y 100%.
– 8 líneas de excitación láser controlados por filtro óptico modificable (AOTF) para un preciso control (0-100%):
- Ultra violeta: 405 nm
- Argón: 458, 476, 488, 496, 514 nm (único gaseoso)
- Amarrillo: 561 nm
- Rojo: 633 nm
-Tecnología AOBS (Acousto Optical Beam Splitter): permite seleccionar un rango específico de detección de fluorescencia.
– Lámpara UV para visualización en epifluorescencia con filtros DAPI, CFP, GFP y YFP.
– 2 canales de detección de alta sensibilidad (HyDs) , 2 canales PMT con tecnología Photon Booster y un canal de luz transmitida.
-Escaneo bidireccional: permite aumentar la velocidad de escaneo, puede trabajar a una velocidad de 8000 Hz, la velocidad convencional de escaneo es de 400 Hz. De esta manera se disminuye el photobleaching.
-ZooM: permite aumentar la magnificación en una región hasta 10-15x.
– Objetivos:
- 2.5x/ PL APO
- 5x/PL APO
- 10x/0.40 PL APO CS2
- 20x/0.75 PL APO CS2
- 40x/1.10 PL APO CS2 (inmersión en agua)
- 63x/1.40 PL APO CS2 (inmersión en aceite)
– Objetivos para DLS:
- Illuminación: 2.5x/0.07, 5x/0.15
- Detección: 5x/0.15, 10x/0.3, 25x/0.95 (10x y 25x immersión en agua)
– Platina XY motorizada para escaneos del tipo Tile Scan y Mark and Find.
– Platina Super Z Galvo que permite obtener imágenes con mayor nitidez, velocidad y precisión en el plano Z. Además permite observar en vivo en el eje Z.
– Detección secuencial de la fluorescencia.
– Incubadora para ensayos In vivo, incluyendo equipo para control de la temperatura y CO2
Dirección:
Dra. Georgina Cardama.
Equipo de trabajo:
Dra. Caligiuri Lorena
Dra. Noraylis Lorenzo
